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關于高效液相色譜儀怎樣選擇填料粒度的問題
發(fā)布時間:2020-04-07 點擊:1266

目前,商品化的色譜料粒度從1um到超過30um均有銷售,而目前分析分離主要用3um、5um和10um填料,填料的粒度主要影響填充柱的兩個參數,即柱效和背壓。粒度越小,填充柱的柱效越高;小于3um的填料應用,在相同選擇性條件下,提高柱效可提高分離度,但不是唯一的因素。如果固定相選擇是正確,但是分離度不夠,那么選擇更小粒度的填料是很有用的,3um填料填充柱的柱數比相同條件下的5um填料的柱效提高近30%;然而,3um的色相譜的背壓卻是5um的2倍。

與此同時,柱效提高意味著在相同條件下可以選擇更短的色譜柱,以縮短分析時間,另外,可以采用低粘度的溶劑做流動相或增加色譜柱的使用溫度,比如用乙腈代替甲醇,以降低色譜柱的壓力。

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高效液相色譜儀色譜柱

關于高效液相色譜儀如何保證良好的柱性能與柱壽命


◆ 過夜或貯存時,沖洗掉鹽和緩沖液,用純有機溶劑流動相保存(乙晴最好)。??

◆ 盡量減少壓力波動,避免機械及熱沖擊;??


◆ 認證閱讀色譜柱使用說明書;


◆ 使用填充良好的色譜柱;

◆ 經常以強溶劑沖洗色譜柱;??

◆ 使用保護柱及在線過濾器;

◆ 用穩(wěn)定的固定相(C18最穩(wěn)定);

◆ 充分過濾樣品及流動相,盡量避免雜質微粒與強保留成分;

◆ 色譜柱使用溫度最好小于40℃;??

◆ 在中等PH值操作(6~8),用有機緩沖溶液;

◆ 流動相中含有緩沖溶液,應注意應95∶5的水及有機溶劑過渡,有機溶劑不能低于5%;??

◆ 硅膠基質的的色譜柱,應保持流動相的PH值范圍在3.0~8.0;

◆ 在水流動相與緩沖溶液中加200ppm的疊氮鈉;




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